Jessica Ransinan

Etude du trafic intracellulaire de la protéine TWIK-1 (Canal potassique des K2P).
Le but de l'étude était de déterminer les stimulus et les séquences en acides aminés impliqués dans la relocalisation de la protéine à la membrane plasmique.
Cela était fait sur des cellules immortalisées en culture MDCK.
Pour cela, des techniques de biologie moléculaire ont été utilisées comme le clonage et le sous-clonage. Il a été fait de la mutagenèse dirigée et la création de chimères entre différents membres de la famille de ces canaux potassiques.
Le suivit de la protéine s'est fait par immunofluorescence sur cellules fixées. Mais aussi, par microscopie confocale en temps réel sur cellules vivantes avec différents fluorophores activables ou pas liés aux différents mutants.
Ces expériences ont été faites suivant différentes conditions de milieux extra-cellulaires afin de voir sa relocalisation à la membrane plasmique.
J'ai pu aussi approcher les techniques de protéomique dont l'immunoprécipitation, la solubilisation à partir de cellules en culture ou d'oeufs de xénopes.