Mathias ANTOINE

Purification et Caractérisation de Protéines

_ Homogénéité, Etat oligomérique (SEC-MALS, DLS, SAXS)
_ Identité, Modification post-traductionelles (ESI-MS)
_ Stabilité, Optimisation des tampons (CD, DLS, DSF)

Interactions Protéine-Ligand

_ Cinétique d'association / dissociation (Stopped-Flow Fluorescence)
_ Mesure directe d'interaction, Stoechiométrie (Fluorescence, ESI-MS supramoléculaire en conditions natives, CD)

Biologie Structurale

_ Cristallogenèse
_ SAXS

Fixation des ligands et dynamique conformationelle de la Glucokinase humaine.

Etude du mécanisme catalytique de la CO déshydrogénase II de Carboxydothermus hydrogenoformans, une enzyme à centres [Ni-4Fe-5S] et [4Fe-4S].

Metallo-enzymologie : Spectroscopie UV-Vis - Notion de RPE - Travail en chambre anaérobie.

Les Méthionine Sulfoxyde Réductases de classe A : catalyse, spécificité structurale et relations structure-fonction.

Laboratoire de Maturation des ARN et Enzymologie Moléculaire

Directeur de thèse : Pr. G. Branlant et Co-Directeur : Pr. S. Boschi-Muller.

Génie génétique : Clonage - Séquençage - Mutagenèse dirigée - PCR.

Microbiologie : Culture cellulaire bactérienne (E .coli). Surexpression de protéines recombinantes - Marquage isotopique N15/C13.

Purification de protéines : Chromatographie basse pression, FPLC (filtration sur gel - échange d’ions - interactions hydrophobes), HPLC (phase inverse).

Enzymologie – Biochimie des Protéines : Cinétique à l’état stationnaire et pré-stationnaire (stopped-flow et quenched-flow) - Etudes cinétiques en fonction du pH - Spectroscopie optique : absorption UV-visible, fluorescence.

Collaborations : Spectrométrie de masse (LSMBO, Strasbourg), RMN (LCPM, Nancy), Cristallographie (LCM3B, Nancy), Chimie théorique (CBT, Nancy), Chimie organique (LCPM, Nancy).