Sandy Garcier

En partenariat avec le projet Babethanol, je travaille actuellement sur la production de biocarburants de seconde génération.
La fermentation des pentoses constitue un réel levier d'optimisation pour la la conversion de la biomasse osidique en éthanol.
Candida shehatae est une levure qui possède naturellement la capacité de fermenter les C5, néanmoins sa tolérance à l'éthanol est faible (45g/l). L'objectif de mon travail est d'augmenter cette tolérance par adaptation de la souche a l'éthanol.
Techniques utilisées : Fermentation en continue, mutation par UV, repiquage par culture successives, définition de procédés fed batch, batch ....
Outils utilisés : fermenteurs 5L, 1L, Spectromètre de masse, HPLC, CPG, YSI
Logiciel de lissage et de réconciliation interne au laboratoire, Détermination des demandes en oxygène, des vitesses spécifiques, des rendements, des bilans carbones et redox, des seuils de tolérances ....

Etude dans le cadre du projet Futurol Procethol 2G.
Etude de l'impact du CO2 sur la viabilité cellulaire de S. cerevisae.
Objectif : Pouvoir augmenter la biomasse viable et ainsi lle rendement de fermentation.
Techniques utilisées : Recherches bibliographiques, Fermentation en mode fed-batch et suivi de fermentation (matière sèche, dénombrement cellulaire, étude de la cultivabilité...), outils analytiques : (HPLC, CPG, YSI), Exploitation de données (Bilans carbon, redox, étude des gaz (rO2, qO2 et CO2, QR...), détermination des rendements...)

2010 (6 mois en cours) : Industrie PURATOS. Site Beldem à Andenne (Belgique). 200P. Equipe R&D
fermentation, 5P. Agroalimentaire, Protéase
Projet : Etudier et comprendre les paramètres influant sur la production enzymatique et sur l’up-scaling afin d’optimiser le changement d’échelle entre erlenmeyers 250 ml et fermenteurs 15L. Fermentation en système microbien pour la production d’une protéase extracellulaire.
Mission:
- Recherche bibliographiques sur les paramètres influant le scale-up,
- Définition et exécution de process pour le scale-up Erlen/ fermenteur 15L,
- Etude de l’influence de différents paramètres (vitesse d’agitation, débit d’aération, régulation de la pO2) sur la production de la protéase dans un but d’optimisation,
- Détermination via le système RAMOS (Respiration Activity MOnitoring System) des paramètres d’OUR, CPR, RQ en erlenmeyer. Etude de l’impact de différents paramètres (volume de milieu, vitesse d’agitation, quantité d’inoculum, etc.) sur le transfert d’oxygène.

Techniques utilisées : Culture en erlenmeyer et fermenteur 15L, Suivi de fermentation, Dosage enzymatiques, Culture en système RAMOS. Rédaction de rapports techniques et d’un rapport de stage.

Mission en partenariat avec l'Institut Pasteur de Tunis.

- Amplification de plasmides,
- Transfection en cellules eucaryotes,
- Purification de peptides recombianants
- Test de l'activité de ces peptides sur des lignées de cellules cancéreuses.

Outils utilisés : PCR, transformation bactérienne, transfection à la lypofectamine, purification sur
billes de nickel, microscopie en fluorescence, culture cellulaire, Western Blot. Rédaction de rapports et de cahiers de laboratoires.

Résultats : Projet mené à terme. Mise en place d’un protocole optimisé de purification.