Valérie Machi
Ingénieur Biochmiste
BIOCHIMIE
- Western-Blot & Electrophorèse de protéines en conditions natives et dénaturantes
- Immunoprécipitation sur agarose couplé aux protéines G ou à la Streptavidine
- Coloration de gel polyacrylamide au bleu colloïdale G250 (révélation des protéines en vue séquençage)
- Coloration de gel polyacrylamide au Pro-Q Diamond (révélation des phosphoprotéines)
BIOLOGIE MOLECULAIRE
- BACTERIOLOGIE – CLONAGE : Culture de bactéries [Escherichia Coli (DH5a, TG2) & Epicurian Coli® XL10-Gold]
Digestion, blunt, déphosphorylation, extraction et ligation enzymatique
Transformation de bactéries compétentes
Purification d’ADN plasmidique (Mini, Midi et Maxi Prep)
- TRANSCRIPTOMIQUE : RT-PCR, Q-RTPCR & PCR
CHIMIE : Electrospinning, Quartz crystal microbalance (QCM)
CULTURES CELLULAIRES primaires & en lignées (adhérentes et en suspensions), viabilité (MTT, MTS, Alamar Blue®)
CYTOMETRIE EN FLUX : FACS Calibur (marquage de surface, analyse du cycle cellulaire, apoptose)
IMMUNOCHIMIE ELISA ; Production & purification d’anticorps monoclonaux à partir d’hybridomes
MICROSCOPIE
- optique à contraste de phase et microscopie confocale ; Immunocytochimie ; Immunofluorescence
- microscopie électronique à balayage (MEB)
TRANSFECTIONS & INFECTIONS
- Infection avec Adenovirus
- Commerciales transitoires (Xtreme gene, Lipofectamine, INTERFERin …)
- Transitoires avec des vecteurs synthétiques
- Analyser le taux de transfection par luminométrie, microscopie, MTS…
VECTEURS SYNTHETIQUES
- Formulation de sphérulites™, de liposomes et de lipoplexes
- Mesure du taux d’encapsulation et de la stabilité des vecteurs par spectrophotomètrie
- Mesure de la taille et du potentiel Zéta (Charge) des particules (Zétasizer NanoZS)
10 contactsDéveloppement d’assemblages actifs de polyélectrolytes destinés au recouvrement de biomatériaux et à l’ingénierie tissulaire de l’os et de la gencive
2008 - 2010Etude du mécanisme d’action du Nucant 6L et de ses analogues sur des cellules cancéreuses. Identifier le(s) récepteur(s) membranaire(s), vérifier l’immunogénicité du peptide, caractériser son effet cytotoxique, rechercher les modifications transcriptionnelles engendrées par le peptide
2007 - 2008« Délivrance de molécules actives sur des cellules en lignées par des vecteurs synthétiques de type sphérulites™ ou liposomes. Analyse de l’efficacité de transfection, mesure de l’expression protéique et test de cytotoxicité. Caractérisation de ces particules lipidiques en taille et potentiel de surface »
« Évaluations biologiques de vecteurs de médicaments de type lipoplexes et liposomes sur différents types cellulaires en culture par analyse de la délivrance, test de la cytotoxicité et études de la stabilité de ces vecteurs»
2006 - 2006« Détermination de l’implication de l'oncogène k-ras dans la chimiosensibilisation de l’adénocarcinome pancréatique par le biais de transfection transitoire avec des siRNA sur des cultures cellulaires pancréatiques humaines, d’analyse de l'expression de k-ras, et de test de cytotoxicité. Transfection in vivo sur des xénogreffes de tumeurs d'origine humaine chez la souris Nude »
« Action combinée de l’adénovirus Carboxyl-estérase et de la Camptotécine sur des cellules tumorales pancréatiques en culture, analyse de l’expression protéique résultante, test de l’activité enzymatique et test de cytotoxicité»
« Clonage d’un vecteur d’expression plasmidique »